美国联邦贸易委员会给出了生物柴油和生物质柴油的定义，以澄清它们之间的差异。根据联邦贸易委员会的定义，生物质柴油是指“产自非石油可再生资源的柴油燃料的替代品，符合美国环保署根据42 U.S.C.7545制定的燃料和燃油添加剂注册要求。非石油可再生资源包括提取自家禽脂肪及家禽粪便等动物废料和其他废弃物或者衍生自废水和废水处理的城市固体废物和污泥以及油的燃料。该术语不包括生物柴油。”
美国环保署修订可再生燃料标准（RFS2）于2010年2月最后敲定。生物质柴油定义为“生命周期温室气体排放量至少比基准生命周期温室气体排放量低50%的可再生燃料”，并符合以下所有要求：（1）它是一种运输燃料、运输燃料添加剂、取暖油或喷气燃料；（2）它符合生物柴油或非酯可再生柴油的定义；及（3）如果燃料或燃料添加剂用于汽车，它则需按照40 CFR part 79 注册为汽车燃料或燃料添加剂。美国环保署澄清与石油一起加工的可再生燃料不是生物质柴油。
另一方面，生物柴油指“衍生自植物或动物物质的长链脂肪酸的单烷基酯，需要满足：40 CFR Part 79 对燃料和燃料添加剂的注册要求，以及美国试验与材料协会标准 D6751 – 07b（用作中间馏份燃料的生物混合柴油燃料（B100）的标准规范）的要求。”
生物混合柴油是生物柴油和石油柴油燃料的混合物。同样，生物质混合柴油包含生物质柴油和柴油。
联邦贸易委员会为这些柴油替代品指定了标签颜色—生物柴油为蓝色，生物质柴油为橙色。燃料名称显示在标签的上半部分。表明柴油替代物的准确比率的文字显示在名称的下面。
含有超过5％的生物柴油或生物质柴油的混合燃料需要按照联邦贸易委员的规定贴上标签。 含有5％或不到5%的生物柴油或生物质柴油的混合燃料不需要标签。
位于美国佛罗里达州迈阿密的Beta Analytic公司是一家获得ISO 17025标准认证的放射性碳测年实验室。公司推广ASTM D6866的使用，以验证生物燃料混合物的精确性。
ASTM D6866可用于测试燃料的可再生含量。该方法通过量化样本中的碳14含量可以很容易地确定生物柴油或生物质柴油的混合量。混合燃料的其他组成部分石油柴油则没有碳14。因此，通过ASTM D6866测定的碳14可以被认为是提取自生物质的混合燃料的比例。
